Сын Албоино делла Скала из династии Скалигеров, оказавшей значительное влияние на городскую культуру. В 1262 – 1387 гг. был наместником. После кончины Кан Гранде I делла Скала, приходившемуся ему дядей, как только возглавил Верону, не стал придерживаться сбалансированной политики своего отца, а пошел войной на соседних правителей, в результате чего владения Вероны расширились до Тосканы. В 1332г. была завоевана Брешия, а в 1335г. – Парма и Лукка в Тоскане. В результате Милан, Флоренция и Венеция объединились в Лигу, и вступили в войну с Вероной.
Одни только венецианцы смогли выставить армию в 40 000 человек. Боевые действия проходили на всей территории Скалигеров, с переменными успехами для обеих сторон.
На начальном этапе военных действий Мастино II имел успехи, однако после присоединения к Лиге правителя Милана Аццоне Висконти, правителя Феррары, Гонзага из Мантуи, а также Папской области, чаша весов склонилась на сторону его врагов.
В конце концов, Мастино II делла Скала потерпел поражение и утратил Парму, а Лукку вынужден был уступить за денежное вознаграждение Флоренции.
В марте 1337 года после длительных переговоров враждующие стороны пришли к мирному соглашению, которое позволило Венеции вернуть захваченные земли.
Мастино II, недовольный условиями мирного соглашения, призвал на помощь в качестве посредника императора Людовика IV, но император встал на сторону дожа Венеции Франческо Дандоло и получил взамен права на город Местре. 24 января 1339 года мирный договор был заключен в базилике Святого Марка в Венеции.
Мастино II делла Скала умер в Вероне в 1351 году. Похоронен в готическом мавзолее рядом с церковью Санта Мария Антика, в одной из известных гробниц Скалигеров — Арке Мастино II.